Kreatin blir laget fra aminosyrene glycin, arginin og metionin i form av S-adenosylmetionin. Kreatin finnes i fler tautomere former. Den sykliske formen av kreatin kalles kreatinin.
Første trinn i er koblingen mellom arginin og glycin katalysert av arginin-glycin amidinotransferase som gir produktet guanidinoacetat, og er lokalisert i lever og nyrer:
glycin + arginin → guanidinoacetat + ornitin
Neste trinn er en metyleringsreaksjon med S-adenosylmetionin katalysert av metyltransferase:
guanidinoacetat + S-adenosylmetionin → kreatin + S-adenosyl-homocystein
Kreatin kan omdannes til fosfokreatin katalysert av kreatin kinase:
kreatin + ATP → fosfokreatin + ADP
Fosokreatin blir brukt som en energibuffer i muskler og hjernevev.