Alfa-enolase deltar i glykolysen og metaolisme av glukose hvor det katalyserer reaksjonen fra 2-fosfoglycerat til fosfoenolpyruvat med magnesium som kofaktor
2-fosfoglycerat ⇔ fosfoenolpyruvat + H2O
I kreftceller er det økt uttrykk av genet ENO1.I glukoneogenesen (revers glykolyse) omdanner enzymet den motsatte reaksjon fra fosfoenolpyruvat til 2-fosfoglycerat. Alfa-enolase kalles også ikke-nevral enolase.
Hos mennesker finnes alfa-enolase (αα) i cytoplasma i alt cellevev. Som alternativ spleiset from av genet ENO1 er det i form MBP1 som virker som et tumorsupressorprotein lokalisert i cellekjernen.
Beta(β)enolase (ββ) finnes istørre mengder i muskler
Gamma (γ)enolase (γγ) finnes i høye konsentrasjoner i nevroner og nevroendokrint vev, kalt nevrospesifikk enolase. Nevrospesifikk endolase blir også brukt som biomarkør i medisinsk diagnostikk.
Når flere isoenzymer er tilstede i samme celle finnes de som heterodimere αβ og αγ.
Alternativ spleising av mRNA fra genet ENO1 kan lage et myc-bindende protein1 (MBP1) som er med å senke proteinmengden til c-myc-protoonkogen. MBP1 virker således som et tumorsupressorprotein ved å binde seg til promoteren for c-myc-protoonkogen og interferer med Wnt-signalveien.